了解一下什么是Miracloth濾布吧
更新時間：2020-04-20 點(diǎn)擊次數(shù)：2571次
基因工程轉(zhuǎn)化真菌和一些土壤細(xì)菌時，往往需要先消化掉厚厚的細(xì)胞壁，制備分離原生質(zhì)體以便進(jìn)行轉(zhuǎn)化，即使是大家很熟悉的酵母轉(zhuǎn)化，當(dāng)簡便的醋酸鋰方法不起作用時，zui原始也是zui有效方法還是原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化。
當(dāng)經(jīng)過消化處理的菌體混合液經(jīng)過Miracloth濾布過濾后，就可以去掉未被消化*的菌體和雜質(zhì)，分離得到的“裸露的"原生質(zhì)體就可以準(zhǔn)備進(jìn)行轉(zhuǎn)化或者電轉(zhuǎn)了。如果沒有這一步的分離，未*消化的菌體由于生長迅速，會嚴(yán)重干擾結(jié)果。
植物基因組純化相對比較麻煩一點(diǎn)，市面上有不少試劑盒可供選擇，多數(shù)純化基因組DNA的試劑盒采用快速離心方法，其純化產(chǎn)物大小僅為50kb左右。你可能沒有想到，一種改良的Miracloth濾布快速純化方法是另一種經(jīng)濟(jì)有效的選擇：通過液氮研磨得到的組織經(jīng)過裂解液處理，溫浴、醋酸鉀冰浴復(fù)性，用Miracloth過濾，得到的濾液可以直接用異丙醇沉淀。這個方法改良于玉米基因組純化，特別適合各種植物組織DNA的純化。zui大的優(yōu)點(diǎn)是快速經(jīng)濟(jì)實(shí)用，不需要昂貴的試劑盒或者試劑，整個方法就像用試劑盒一樣簡單。
如果需要植物組織的高分子量基因組就不宜采用試劑盒。Miracloth是另外一個好選擇--植物組織勻漿后直接用Miracloth過濾就可以得到含有細(xì)胞核的溶液，離心沉淀細(xì)胞核，后繼的高分子量基因組抽提就簡單易行了。此外，這個方法還可以用于制備研究轉(zhuǎn)錄因子所用的細(xì)胞核抽提物(Cell Nucleic Extract)，甚至分離純化線粒體DNA、細(xì)胞膜等等。
其實(shí)Miracloth就是簡單的一種微孔濾膜，比干酪布好用得多。只要你想得到，就有比產(chǎn)品說明書更廣泛而有趣的用途。比如有人用在植物真菌培養(yǎng)，甚至還有人用在抗體細(xì)胞培養(yǎng)中。聰明的你是不是也能想到其他用途?只要有創(chuàng)意，這不起眼的小東西一樣可以在實(shí)驗(yàn)室中發(fā)揮重要作用喲。
